【摘要】：目的探讨单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)感染对人成神经细胞瘤细胞SH-SY5Yβ-淀粉样蛋白(Aβ)表达的影响。方法通过非洲绿猴肾细胞Vero扩增HSV-1,测定病毒滴度。取感染复数(MOI)为10的3.2×108PFU/mL HSV-1分别感染SH-SY5Y细胞12、24 h,显微镜下观察SH-SY5Y细胞的形态变化,使用PCR检测细胞中HSV-1 DNA的表达;双色免疫荧光检测SH-SY5Y细胞中Aβ和载脂蛋白E(ApoE)的表达;蛋白质印迹法检测淀粉样蛋白前体(APP)、黑素代谢酶(MME)、ApoE、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、磷酸化糖原合成酶激酶3β(p-GSK-3β)蛋白的表达。结果 HSV-1感染SH-SY5Y细胞12 h后,镜下可见细胞突触减少,突起回缩;感染24 h后细胞开始聚集,呈圆形,并有细胞脱落。与磷酸盐缓冲液(PBS)对照组相比,HSV-1感染12 h后细胞中Aβ表达增加(P0.01),ApoE蛋白表达无明显改变;感染24 h后,Aβ表达仍增加(P0.05),但弱于12 h时(P0.01),APOE蛋白表达增加(P0.01)。蛋白质印迹分析结果显示,与PBS对照组比较,HSV-1感染12 h后细胞中APP蛋白的表达水平降低(P0.05),GSK-3β总蛋白的表达水平增加(P0.05)且磷酸化活性增强(P0.05),MME蛋白的表达水平增加(P0.05);感染24 h时MME蛋白的表达水平降低(P0.05),ApoE蛋白的表达水平增加(P0.05)。结论 HSV-1感染后可诱导SH-SY5Y细胞Aβ表达增加,在感染12 h时可能通过促进APP代谢、GSK-3βSer9磷酸化诱导Aβ产生,而在24 h时主要是通过抑制Aβ降解促使Aβ表达增加。

【分类号】：R749.16
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