摘要：目的：研究不同剂量的杜仲提取物水溶液对小鼠亚慢性毒性作用，为临床应用提供依据。方法：给实验小鼠灌服不同剂量的杜仲提取物水溶液。在实验中、末期停药后24 h，分别取血测定血液学、血液生化和主要脏器指标，并作病理切片。结果：灌胃中、低剂量（2.06 g/kg，0.69 g/kg）的杜仲提取物水溶液，能够提高小鼠血红蛋白含量和红细胞数（P＜0.01），对白细胞分类计数无影响，同时能够提高小鼠体重、总蛋白及白蛋白含量（P＜0.01），对脾脏、肝脏、心脏、肺脏、肾、性器官指数及血清酶活性无影响（P＞0.05）。结论：杜仲提取物对受试动物未见有明显毒性作用。

关键词：杜仲； 亚慢性毒性

Abstract：Objective: To research the effect of Eucommia ulmoides extract solution on mice subchronic toxicity, to provide basis for clinical use. Methods: Gave experiment mice different doses of Eucommia ulmoides extract solution, in mediumterm and after administration for 24 h, blood physiological, blood chemistry, the main viscera coefficient were tested. Results: By gastrogavage, the middle and low dose of Eucommia ulmoides extract solution improved the content hemoglobin(Hb) and red blood cell count, but had no effect on white blood cell count (P＜0.01). It increased mice weigt、total protein content、white protein content (P＜0.01) ,but had no effect on indexes of spleen, live, heart, lung, kidney, sexual organ and the activation of serum enzyme (P＞0.05) .Conclusion: Eucommia ulmoides extract has no toxicity to mice.

Key words: Eucommia ulmoides; Subchronic toxicity

　　我国对杜仲（Eucommia ulmoides）的利用历史悠久，近几年我国学者在杜仲的生物学、化学成分、生理生化等方面做了许多研究，已知杜仲的化学成分主要有：（1）木脂素类；（2）环烯醚萜类；（3）酚类化合物等，唐建军［1］、李家实等［2］认为，杜仲中有效成分对动物血压有双向调节功能。唐建军等［1］报道：杜仲含有丰富的VE和 β-胡萝卜素，有延缓衰老、增强机体免疫体力作用。为了更好地开发利用杜仲，我们探索了张家界产杜仲提取物（以下简称杜仲提取物）对动物亚慢性毒性作用，并为临床应用提供一定的理论依据。

1  材料

　　1.1  药品与动物杜仲提取物：主要成分：80%氯原酸，由张家界恒兴生物科技公司提供。昆明种小鼠，雌雄各半，体重（20±2）g，8周龄，购于湖南中医学院实验动物中心，批号：990218。

1.2  仪器ES-C300A电子天平，湘仪天平仪器厂。MD-100自动生化分析仪器仪。美国 Leyte Drive Torranle化学仪器公司生产。

2  方法与结果

　　2.1  小鼠最大耐受量采用最大给药量［3］法，在预试基础上，取小鼠100只，雌雄各半，体重（20±2）g，随机分成5组，分次灌服不同剂量杜仲提取物水溶液0.5 ml/次，观察7 d内动物死亡数，同时观察动物一般状况及活动情况。结果见表1。动物在7 d内均无异常反应，考虑到杜仲的浓度以及小鼠的灌胃容积都已达到最大，因此，杜仲提取物的小鼠灌胃最大给药量应大于18.52 g/kg。按小鼠的平均体重为20 g，成人平均体重60 kg，成人每日用量6~9 g［4］计算，小鼠的最大耐受倍数=18.52×60/9=124（倍），故认为本药具有较大的安全性。

　　2.2  杜仲提取物对小鼠的亚慢性毒性实验［5，6］取健康小鼠80只，体重为（20±2） g，雌雄各半，分笼颗粒饲料喂养，将小鼠随机分为3个剂量组6.17，2.06，0.69 g/kg和1个对照组（生理盐水）。各组分别以0.5 ml/次容量灌胃：1次/ d，连续8周，每周停药2 d，期间每周称重，并根据体重调整药量。同时观察动物的一般体征。实验中、末期停药后24 h，测定血液学指标 Hb，RBC，WBC和白细胞分类计数（DC）及血液生化指标（TP，ALB，AST，ALT，BUN，ALP和GLu），两次采血后分两批处死动物，对（心、肝、脾、肺、肾、性腺）主要脏器计算脏器重量系数，并做病理切片检查。

　　表1  小鼠灌胃给药最大耐受量（MTD）的测定(略)

　　2.2.1  杜仲提取物对小鼠体重的影响结果由表2可看出，各组小鼠在第4，8周时，中、低剂量组（2.06，0.69 g/kg）与对照组差异极显著（P＜0.01），出现明显的增重。第8周时，高剂量组与对照组差异不显著（P＞0.05）。

　　2.2.2  小鼠血液学指标的变化结果见表3。由表3可知，实验第4，8周时，浓度为2.06，0.69 g/kg杜仲的提取物能够显著提高小鼠的Hb含量及RBC（P＜0.01）。在6.17 g/kg的浓度水平下，第4周杜仲提取物显著提高小鼠的 Hb含量及RBC（P＜0.05），第8周与对照组比较无显著差异（P＞0.05）；实验组N，L，E，M计数与对照组比较均差异不显著（P＞0.05）。

　　2.2.3  杜仲提取物对小鼠血液生化指标的影响结果见表4。由表4可知，第4，8周，中、低剂量组TP、ALB含量均极显著的高于对照组（P＜0.01）。TP含量高剂量组第4周高于对照组（P＜0.05），第8周则无差异显著性（P＞0.05）；ALB含量第4周与对照组比较差异不显著（P＞0.05）；第8周低于对照组（P＜0.05）；G的含量第4周高剂量组和第8周各组高于对照组（P＜0.05）；BUN含量高剂量组与对照组相比差异显著（P＜0.05），中、低剂量组与对照组无显著差异（P＞0.05）。

　　表2  小鼠平均体重变化(略)

　　每组均与对照组比较，*表示5%的显著水平，**表示1%的极显著水平（下同）

　　表3  小鼠血液学指标(略)

　　动物数上排为给药后4周，下排为第8周停药后2 d（下同）

　　表4  小鼠血液生化指标(略)

　　2.2.4  杜仲提取物对小鼠主要脏器的影响由表5可知，各实验组脏器指数与对照组比较无显著性差异（P＞0.05）。

　　表5  小鼠主要器官指数(略)

　　2.2.5  杜仲提取物对小鼠病理组织形态学的观察实验中、末期分别对小鼠进行剖检，观察各组织器官未见明显的眼观病理变化，对各组脏器进行镜检，均未见有意义的病理组织学改变。